蛋白标记物的筛选与定量——固相抗体芯片与液相芯片/ELISA的完美结合


  作为生命活动的执行者和调控者,蛋白质已广泛应用于疾病早期诊断和预后指针的相关研究中。但在最初的研究中,往往无法确定哪些蛋白在疾病过程中存在差异化表达的情况。而这些差异化表达的蛋白对疾病的进程及预后具有明显的指示作用。因此,筛选出疾病中差异化表达的蛋白,并阐明其调控疾病进程的作用及机理具有重要的科学意义和临床价值。

  固相芯片可在初期阶段对小样本量中多种蛋白标志物的表达情况进行筛查,从中筛选出具有显著差异化表达的蛋白标志物。在后续研究中,可利用液相芯片技术和ELISA技术在大样本量情况下对已筛选出的差异化表达的蛋白标志物的表达情况进行进一步地精确定量验证。通过以上实验思路,可以在临床水平、动物水平和细胞水平上筛选出与疾病相关的差异化表达的蛋白,为后续进一步的基础研究指明方向和奠定基础。



抗体芯片

技术简介:

   抗体芯片是蛋白芯片的一种,具有微型化、集成化、高通量化的特点,可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度,目前主要用于信号转导、蛋白质组学、肿瘤及其他疾病的相关研究。

检测内容:

  蛋白表达谱:可检测一种样品的蛋白表达谱,也可检测两种不同样品间蛋白表达水平的相对差异,一次实验可比较出数百种蛋白表达水平的变化。

  磷酸化水平改变:可从几百种已知蛋白中快速筛选磷酸化水平发生改变的蛋白。

适用样本:

组织、血清、血浆、细胞、细胞培养上清等


液相芯片

技术简介:

MAGPIX 是一款多功能液态悬浮芯片系统,能对蛋白、核酸等定性或定量分析,且单孔检测多达50个指标。MAGPIX将以更低的价格、更少的样本让研究者获得更多、更准确的结果。

液相芯片的应用:

 免疫学分析

  细胞因子检测

  受体-配体分析

  酶分析

  蛋白质-蛋白质相互作用分析

  蛋白质-DNA相互作用分子

适用样本:

组织、血清、血浆、细胞、细胞培养上清等

常检测因子:


ELISA

技术简介:

以抗原-抗体反应为基础,将抗原/抗体包被到固相支持物上,并保持其免疫活性,通过捕获目的蛋白,结合后续检测性抗体孵育和酶催化底物显色对目的蛋白的表达情况进行定量分析。

适用样本:

  组织、血清、血浆、细胞、细胞培养上清等



Western blotting

技术简介: 

 通过凝胶电泳将蛋白按分子量大小分开,并转印到PVDF膜上,然后利用特异性抗体对目的蛋白进行检测。最后通过化学发光/荧光发光的方式对目的蛋白进行着色,通过分析着色的位置和着色深度来分析所测样本中目的蛋白的相对表达情况。

适用样本:

  组织、血清、血浆、细胞、细胞培养上清等

                                 



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